磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測試劑盒微量法

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測試劑盒微量法
測定意義： PEPCK（EC 4.1.1.32）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，催化草酰乙酸轉化為磷酸烯醇式丙酮酸，是調節(jié)糖異生途徑的關鍵酶。

測定原理：PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。

需要的儀器，耗材:分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測試劑盒微量法
樣本處理
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液） 進行冰浴勻漿，然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清，置冰上待測。


細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體 積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功 率 20%或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

血清（漿）樣本：直接檢測。